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2015版《中國藥典》蜂蜜中寡糖測定解決方案

發布時間:2016-01-27        內容來源:月旭科技

蜂蜜是頗受青睞的養生保健食品之一,然而,近年來,國內部分蜂蜜生產企業存在摻雜摻假,以假亂真,以次充好的現象,極大損害了我國天然蜂蜜的產品信譽。為此,月旭科技特推出偽劣蜂蜜檢測即蜂蜜中寡糖測定解決方案,希望對我國蜂蜜產品的質量安全提供保障。


1、適用范圍

適用于2015版《中國藥典》一部蜂蜜中寡糖的檢查。

 

2、方法原理

試樣中的高分子糖,經活性炭-硅藻土小柱的富集、濃縮,再用薄層色譜法分離、檢測。經過與麥芽五糖對照品比較,來判定蜂蜜中寡糖的存在。

 

3、樣品和試劑

對照品:麥芽五糖

供試品:純正蜂蜜、摻假蜂蜜

試劑:乙醇(分析純),正丙醇(分析純),三乙胺(分析純),二苯胺(CAS:537-67-7),丙醇(分析純),苯胺,磷酸(優級純),超純水。

 

4、樣品前處理

Welchrom?HON蜂蜜寡糖檢查專用柱凈化;

活化:25ML水,過柱流速1滴/秒

上樣:2g樣品溶于10ml水后,緩慢加到蜂蜜專用柱上

淋洗:25ml 7%乙醇水,不收集淋洗液

洗脫:10ml 50%乙醇水,收集洗脫液

濃縮:洗脫液于65℃水浴減壓濃縮至干

復溶:殘渣加入30%乙醇1ml,搖勻即得


薄層色譜法條件:

TLC板:高效硅膠G薄層板(涂層厚度0.2-0.25mm),110℃活化1小時

展開劑:正丙醇-水-三乙胺=60:30:0.7

顯色劑:苯胺-二苯胺-磷酸混合溶液(取二苯胺1g,苯胺1ml,另算5ml,加丙醇至50ml,混勻)

注:顯色劑最好現配現用

 

注:

整個SPE前處理過程都需要用固相萃取裝置,抽取真空度以確保流速;

旋蒸濃縮時推薦用25ml雞心瓶,防止損失樣品;可少量多次添加溶劑復溶;

活化過程中不能將液面抽干,否則會影響小柱對寡糖的保留效果。

 

5、實驗經過判定

從恒溫干燥箱中取出薄層板,觀察TLC板的顯色情況,純蜂蜜只有Rf值0.35以上的區域有2-3個藍色中帶灰色或咖啡色的斑點,相比較麥芽五糖或會有麥芽五糖的蜂蜜確實從原點開始呈現藍色帶狀樣的斑點群。

對照品和供試品的薄層色譜圖

(a-麥芽五糖對照品,b-純正蜂蜜,c/d/e/f-摻加蜂蜜)

 

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